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          伯樂bio-rad轉印槽的優點和使用前后的注意事項

          發表時間:2020-06-27  |  點擊率:1892
             伯樂bio-rad轉印槽的優點:
            1小時內轉印2塊10x7.5cm凝膠;也可以進行低強度的隔夜轉印。
            電極絲相距4cm以產生強電場保證高效的蛋白轉印。
            彩色標記的轉印夾和電極確保轉印過程中凝膠的正確定向。
            藍色致冷芯可*置于bio-rad轉印槽內,在快速轉印過程中吸收熱量。
            既可作為完整的獨立設備,也可作為一個模塊與緩沖液槽和蓋兼容。
           
            伯樂bio-rad轉印槽使用前后的注意事項:
            1、轉印前準備:在電泳結束前30分鐘應開始準備工作在電泳過程中,提前準備轉印所需物品:根據轉印所用膠的大小,剪一稍比膠大一些的厚濾紙和一剛好大小的厚濾紙,將此兩張膜浸入電轉印液中;再剪四張大小為5cm×2cm的PVDF膜,左下角剪去一角,將此膜浸泡在甲醇溶液中不超過1min后取出浸入ddH2O中1min,取出浸入轉印液中(切濾紙和膜時一定要戴手套,因為手上的蛋白會污染膜)(如果是NC膜,則用鑷子捏住膜的一邊輕輕置于有超純水的平皿里,要使膜浮于水上,只有下層才與水接觸。這樣由于毛細管作用可使整個膜浸濕。若膜沉入水里,膜與水之間形成一層空氣膜,這樣會阻止膜吸水,靠毛細作用自然吸水后再*浸入水中10min以排除氣泡,隨后浸泡入轉移液中)
           
            2、轉印結束,將膜從電轉槽中取出,TBST稍加漂洗3次,每次5-10min;爾后浸沒于封閉液中緩慢搖蕩1h。封閉是將轉印膜上坑坑洼洼的地方用BSA或脫脂奶粉填平,降低抗體的非特異性吸附產生很濃的背景。常用5%BSA和脫脂奶封閉,若是做磷酸化蛋白,只能用BSA,因為,奶中含有磷酸化蛋白。而封閉液濃度,可根據實驗需摸索條件。蛋白面朝上,封閉2h,搖床速度不超過40,結束后直接進一抗。
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